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产品简介
JM109(DE3)菌株来源于 JM109，用于高效表达克隆于含有噬菌体 T7 启动子的表达载体(如 pET 系列) 的基因。λ 噬菌体 DE3 区含有 T7 噬菌体 RNA 聚合酶，该区整合于 JM109 的染色体上，所以称为 JM109 (DE 3)。可同时表达 T7 RNA 聚合酶和大肠杆菌 RNA 聚合酶，用于 pET 系列，pGEX，pMAL 等质粒的蛋白表达。JM109 (DE3) 菌株不可用于蓝白斑筛选试验。太阳集团tyc9728生产的 JM109 (DE3)感受态细胞由特殊工艺制作，pUC19 质粒 (2686 bp，AmpR) 检测转化效率>108 cfu /μg DNA。
产品组成
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组分
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CC601 (10 支)
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CC601 (20 支)
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JM109 (DE3) Chemically Competent Cell
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10 × 100 μl
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20 × 100 μl
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产品应用
高效克隆表达
质量控制
无外源质粒 DNA 残留；
转化效率≥108 cfu/μg pUC19 质粒 DNA。
储存条件
-80℃储存 6 个月，勿置于 -20℃或液氮中保存。干冰运输。
实验方案
1. JM109 (DE3) 感受态细胞从 -80℃拿出，迅速插入冰中，5 min 后待菌块融化，加入目的质粒，并用手拨打 EP 管底混匀，冰中静置 25 min。
2. 42℃水浴热激 45 sec，迅速放回冰上并静置 2 min，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入 700 μl 不含抗生素的无菌培养基 (2YT 或 LB)，混匀后 37℃，200 rpm 复苏 60 min。
4. 5000 rpm 离心 1 min 收菌，留取 100 μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的 2YT 或 LB 培养基上。
5. 将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养。
关键词:
【CC601】 JM109(DE3)化学感受态细胞
感受态细胞
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